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Acclaim液相色譜柱正確使用緩沖鹽的方法是什么

更新時(shí)間:2021-10-26      瀏覽次數(shù):1464
  Acclaim液相色譜柱在使用前,先進(jìn)行柱的性能測(cè)試,并將結(jié)果保存起來,作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測(cè)試時(shí)要按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行,只有這樣,測(cè)得的結(jié)果才有可比性。
 
  本產(chǎn)品可適用范圍廣,從極性化合物到非極性化合物都可獲得良好的分離,在碳水化合物如低聚糖、苷類糖化學(xué),生藥學(xué)和天然產(chǎn)物化學(xué),生物物質(zhì)如多肽、蛋白、核酸等多個(gè)領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。
 
  正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出,因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結(jié)為一句話:使用前要過濾,使用后要沖洗。具體方法如下:
 
  1、等度條件:使用緩沖鹽前和使用后需用過渡流動(dòng)相以1、0ml/min流速?zèng)_洗60min;使用后去除緩沖鹽的另一個(gè)方法是用過渡流動(dòng)相以0、2ml/min流速?zèng)_洗色譜柱過夜。
 
  2、梯度條件:用含有緩沖鹽的流動(dòng)相跑梯度之前,用與初始流動(dòng)相組成相同的過渡流動(dòng)相以1、0ml/min流速?zèng)_洗60min,再用該過渡流動(dòng)相以1、0ml/min沖洗色譜柱120min。含緩沖鹽流動(dòng)相的梯度設(shè)定應(yīng)盡量平緩,以避免梯度過程中緩沖鹽析出。
 
  3、緩沖鹽析出的補(bǔ)救方法:
 
  a、用甲醇/20/80以1、0ml/min流速35攝氏度條件下反向沖洗色譜柱120min
 
  b、用甲醇/水=20/80以0、2ml/min流速反向沖洗色譜柱過夜。
 
  使用Acclaim液相色譜柱可以延長(zhǎng)色譜柱的壽命。但是考慮是否使用保護(hù)柱前,建議評(píng)估以下幾點(diǎn):
 
  (1)保護(hù)柱也不便宜,所以要考慮購買保護(hù)柱的費(fèi)用是否能由所增加的色譜柱壽命補(bǔ)償回來;
 
  (2)保護(hù)柱的壽命有多長(zhǎng)?須注意何時(shí)需要換保護(hù)柱芯,不要因?yàn)楦鼡Q太晚而污染到色譜柱;
 
  (3)如何沖洗保護(hù)柱?沖洗時(shí)需要將保護(hù)柱和色譜柱分開沖洗,以免將累積在保護(hù)柱內(nèi)的不純物沖洗到色譜柱中;
 
  (4)不要期望因?yàn)榧恿?-2cm的保護(hù)柱而會(huì)增加柱效。裝上保護(hù)柱雖然類似增加柱長(zhǎng),但是使用保護(hù)柱也增加了兩個(gè)接頭和連接管路,這些會(huì)造成儀器系統(tǒng)柱效減少,因此如果能維持不裝保護(hù)柱時(shí)的柱效就不錯(cuò)了。
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